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teknova培養(yǎng)基滅菌效果下降的6大因素分析

發(fā)布日期:2022-03-28      點(diǎn)擊:1722
  teknova培養(yǎng)基是結(jié)合解剖,生物化學(xué)和免疫學(xué)方法鑒定組織切片中特異性抗原-抗體相互作用的技術(shù),以各種格式使用,但所有方法都涉及兩個(gè)步驟:樣品制備和標(biāo)簽。
  培養(yǎng)基用于基礎(chǔ)研究,以了解生物組織不同部位細(xì)胞標(biāo)志物和差異表達(dá)蛋白質(zhì)的分布,用于異常細(xì)胞的染色,如在癌性腫瘤中,細(xì)胞增殖和細(xì)胞死亡(凋亡和壞死)的特異性標(biāo)志物的染色。
  樣品制備對于抗體-抗原相互作用的可視化至關(guān)重要,保持細(xì)胞形態(tài),包括下面的組織結(jié)構(gòu)并且還維持靶抗原的表位的方式來制備樣品。固定用于保存組織,常見的試劑包括甲醛,多聚甲醛和戊二醛,它們都在不同程度上作用于蛋白質(zhì)中的可逆交聯(lián)共價(jià)鍵,但是這種固定有時(shí)會導(dǎo)致表位的掩蔽。因此,固定方案基于用于檢測的組織和抗體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)確定和優(yōu)化。
  造成teknova培養(yǎng)基滅菌效果下降的6大因素分析:
  影響培養(yǎng)基滅菌效果的因素除滅菌溫度和時(shí)間外還有培養(yǎng)基的成分和物理狀態(tài)、PH、微生物數(shù)量、微生物細(xì)胞含水量、微生物細(xì)胞菌齡和耐熱性、蒸汽中空氣的排除情況、攪拌和泡沫等。
  1、營養(yǎng)成分的保持:濕熱滅菌時(shí),微生物被殺死的同時(shí),培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞,特別是氨基酸和維生素。如在121℃,僅20min,就有59%的賴氨酸及其他堿性氨基酸被破壞,蛋氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng),造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化,因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量。
  2、微生物的耐熱性:細(xì)菌芽孢的熱阻較大,滅菌所需要的時(shí)間取決于把細(xì)菌芽孢減少到所規(guī)定數(shù)目的時(shí)間。
  3、pH值:對微生物的耐熱性影響很大。
  4、培養(yǎng)基成分:油脂、糖類及蛋白質(zhì)等組成的高濃度有機(jī)物會包于細(xì)胞的周圍形式一層薄膜、影響熱的傳導(dǎo)。而高濃度的鹽類、色素則削弱其耐熱性,滅菌較易。
  5、泡沫:泡沫中的空氣形成隔熱層,使熱量難以滲透進(jìn)去,殺死其中的雜菌。
  6、顆粒:顆粒小,容易滅菌,顆粒大,則難滅菌。

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